Testis Dokusunda Farklı Sıcaklıkların Neden Olduğu Sıcaklık Stresinde Nekroptozisin Ana Düzenleyicisi Olan Rıpk1 Ve Mlkl’nin Belirlenmesi

Abstract

Isı stresine yanıt olarak germ hücre yıkımının meydana geldiği temel mekanizma henüz tam olarak anlaşılamamıştır. Bu nedenle erkek infertilitesinde; inflamatuar yanıt, doku rejenerasyonu ve terapötik stratejiyi etkileyen testis hipertermisinden sonra hücre ölümünde yer alan sinyal yolaklarının açıklanması gerekmektedir. Sıcak stresi ile oluşan germ hücre mekanizmasındaki kayıplar ve zayıflamalar birçok yönü ile araştırılmaktadır. Testiste termoregülasyonun önemi, sıcaklıktaki hafif artışların spermatogenezi bozabileceği ve nihayetinde fertilite ile ilgili sorunlara neden olabileceği gerçeğiyle ortaya çıkmıştır. Isı stresi gibi patolojik durumlarda testis dokusunda, DNA onarımı, ısı şoku yanıtı, oksidatif stres yanıtı, apoptoz ve hücre ölümü dâhil olmak üzere strese maruz kalındığında tetiklenen çeşitli mekanizmalar gelişmektedir. Düzenlenmiş hücre ölümü dokuların yeniden şekillenmesi, organogenez, gereksiz yapıların veya hücrelerin çıkarılması ve hücre sayılarının düzenlenmesi gibi temel süreçlerde yer alır. Güncel olarak nekroptozun çeşitli fizyolojik süreçlerin düzenlenmesinde çok önemli bir rol oynadığı kabul edilmektedir. Nekroptoz sayısız çalışmanın odak noktası olmasına rağmen, mekanizmalarının, tetikleyicilerinin ve fizyolojik rollerinin birçok yönü hala anlaşılmamıştır. Hücre ölüm yollarını anlamak ve bu yolaklar üzerinden hastalıkları tedavi etmek için yapılan deneylerde, hastalıkların patolojisinde nekroptozun önemli bir rolünü destekleyen kesin kanıtlardan yoksun olunduğu bildirilmiştir. Nekroptozisin ana düzenleyicilerin (RIPK1 ve MLKL) testis dokusunda meydana gelen patolojik durumlardaki rolü tam olarak bilinmemektedir. Bu nedenle nekroptozun hangi fizyolojik koşullarda hangi dokuda meydana geldiği bu araştırma alanındaki en büyük cevapsız soru olarak kalmaktadır. Sonuç olarak, nekroptotik hücre ölümünü düzenleyen moleküler olayların daha iyi anlaşılması, bu mekanizmaların çeşitli hastalıklarda yer aldığından, hastalık tedavisi için son derece faydalı olacaktır. Bu alandaki daha fazla araştırmanın, hücre ölümü programlarının terapötik kullanımıyla ilgili umut verici fırsatlar sağlaması beklenmektedir. Bu beklenti doğrultusunda, çalışmamız kontrol grubu ve 6 adet deney grubu olmak üzere 7 gruptan oluşmaktadır, her bir deney grubunda 6 adet Wistar albino cinsi erkek sıçan olmak üzere toplamda 42 adet sıçan kullanılacaktır. Sıçanlar, 39-41°C ve 43-45°C’lik korunan ısıya sahip su banyosunda 8 hafta boyunca her gün 30 dakika yüzdürülerek sıcak stresine maruz bırakılacaktır. Kontrol grubu sıçanlar 25 °C’de korunan su banyosuna muamele edilecektir. Sekiz haftalık ısı uygulamasından sonraki 1. gün, 7. gün ve 14. günlerde hayvanlar anestezi altında iken testis dokuları alınacaktır. Alınacak testis dokularında nekroptozun ana düzenleyicileri hem immunohistokimyasal hem de western blot tekniği ile araştırılacaktır.